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全自动酶联斑点分析仪
德国biosys bioreader 7000系列—酶联斑点、荧光斑点、病毒斑 、克龙形成、种瘤细胞集落形成、赶细胞集落形成试验等分析金标准
酶联免一斑点分析仪可用于酶联免衣斑点实验结果分析,以及病毒斑、菌落、克笼斑等微生物斑点实验结果的分析。可以将单个细胞的分泌可视化。如通过IFN-r,白细胞介素,肿六坏死因子等,分析抗原特异性T淋巴细胞的反应性;也可以检测B淋巴细胞分泌抗题的情况,实现对T、B淋巴细胞功能的研究。显著的优势是高灵敏度,因为细胞的分泌在其周围被直接捕获防止了被稀释、浆解及被周边细胞的受体结合的影响。酶联免yi斑点实验方法敏感性、特异性和可重复性都很高,操作简单迅速,需要少量标本,在检测抗原特异性细胞数量的同时也反应其功能,并与临床结果相关。
03BIOREADER 5000 F γ哪家好*学基础研究
根据检测的*的不同,ELISPOT可以用来区分被activation的不同的T细胞亚群。例如Th1细胞主要分泌IFN-γ,IL-2和TNF-α,而其他一些*如IL-4,IL-5和IL-13一般是由Th2细胞分泌的。在过敏研究中的一个热点就是采用ELISPOT测定Th2型*,因为Th2反应是过敏的主要反应,但通常都是低频率岀现,需要高度灵敏方法才能被成功检测到。
04过敏研究
在针对特异反应性过敏的*treat中监测T细胞*反应;在细胞介导的接触过敏的体外检测诊断的应用中,ELISPOT方法受到越来越多过敏工作者的关注。因为对于像Th2型反应主要*IL-4这样的一贯很难通过其他方法如 flow cytometry和ELISA检测到的因子来说,应用高灵敏度的ELISPOT方法对于研究过敏原特异性*反应显得尤为重要。
酶联*斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞*学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及*(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,在国内外*学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生*,此*被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,BEI捕获的*与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了*,通过酶联*斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
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