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全自动酶联斑点图像分析仪
德国biosys厂家的bioreader系列全自动酶联斑点图像分析仪
LED三维均匀照射光源,形成环形立体无影光源,均匀照射;
一体化套装软件:在同一软件中,同步完成斑点图像扫描、斑点计数与数据分析
全自动采集各孔ELISPOT图像、自动计数分析及数据输出功能
样品自动居中,自动曝光,自动白平衡,镜头自动聚焦,自动光照调节
同步完成96孔板斑点图像采集与计数分析≤2 min
每孔图像扫描和计数速度:≤1.4sec
分析区域:可以是整板、单个孔或者任意选定区域
软件可实现自动的设置计数参数,自动进行计数;也可根据实验情况调整优化计数参数,手动添加、删除单个斑点或斑点群,进行结果修正。
内置多种细胞因ZI计数参数,可直接调用参考。
量化分析:可根据斑点大小及光密度进行细胞因ZI分泌量化分析(Activities)。
统计学插件EliStat统计分析各孔细胞斑点分布、抗原刺激强弱、细胞因ZI分泌量化比较等
一次性校准,同类板免校准,提高读板速度和水平
对每孔都可以进行统一的或不同的参数设置,一个板上若检测多种细胞因ZI,可以一次性完成计数分析
具备质控功能:利用QC板可对仪器相机、光源等读板条件进行校准,保证斑点判读标准的一致性
软件可升级含全光谱的荧光检测功能,升级荧光通路后可用于检测FluoroSpot
T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性*反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他*,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身*性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病*患者的测试。
T细胞的ELISpot分析应用:
B细胞ELISpot分析是分析Antibody*反应的有力工具,并且是仅有的少数能直接聚焦于Antibody分泌细胞(ASC)的分析方法之一。 这种J为灵敏的方法使研究人员能够识别样品中的ASC,并测量其总数以及那些对特定抗原分泌Antibody的数量。
例如,B细胞ELISpot可以揭示血液中长期记忆B细胞的数量,这是无法用其他方法评估的。B细胞ELISpot的主要应用包括检测B细胞对*的反应和vaccine引发的反应。
酶联*斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞*学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及*(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,在国内外*学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生*,此*被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,BEI捕获的*与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了*,通过酶联*斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
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