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T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性*反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他*,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身*性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病*患者的测试。
T细胞的ELISpot分析应用:
B细胞ELISpot分析是分析Antibody*反应的有力工具,并且是仅有的少数能直接聚焦于Antibody分泌细胞(ASC)的分析方法之一。 这种J为灵敏的方法使研究人员能够识别样品中的ASC,并测量其总数以及那些对特定抗原分泌Antibody的数量。
例如,B细胞ELISpot可以揭示血液中长期记忆B细胞的数量,这是无法用其他方法评估的。B细胞ELISpot的主要应用包括检测B细胞对*的反应和vaccine引发的反应。
斑点酶联*分析仪多少钱简介
随着酶联*分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种*及Antibody研究有了新的突破。在研究*应答机制时以往常用用酶联*吸附法( ELISA )检测体液中游离的*( CK )或Antibody,但由于游离的循环Antibody或 CK 的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与target organ结合,而不能确切的反映体内的Antibody及 CK 的水平。 80 年代,国外的科研工作者根据 ELISA 技术的基本原理,建立了体外检测特异性Antibody分泌细胞和 CK 分泌细胞的固相酶联*斑点技术( ELISPOT )。因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外广泛应用,对探索自身*系统疾病发病机制具有重要意义。
斑点酶联*分析仪多少钱(ELISPOT)的原理是什么呢
(一)原理:细胞受到刺激后局部产生*,被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后,再与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
(二)ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应,在Microplate reader上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从20万~30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb,在研究者以刺激剂activation细胞时,不会影响活化细胞分泌*。
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