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主营：细胞力学设备,微观生物力学设备,生物打印机,电子材料打印机
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酶联*斑点检测多少钱实验步骤与原理示意 （示意图如下）
大致原理上分为如下7个步骤，详情已具体产品说明书为准
Step.1 包被：将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育：在有刺激的情况下加入细胞，孵育，细胞分泌*
Step.3 捕获分泌物：activation后的细胞，分泌的*被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody：去除细胞，清洗平板，加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物：加入链霉亲和素偶联物，保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物：当酶催化时，显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析：在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
酶联*斑点检测多少钱已成功应用领域酶联*斑点检测多少钱已成功应用领域
01*性疾病诊断与研究
ELISPOT除了作为一种科研工具，也被用于临床诊断。近期First个被SFDA批准的基于ELISPOT法的诊断平台(T-Spot.TB)上市。这项用于检测tuberculosis*的测试方法，是通过测量tuberculosis特异性抗原刺激后的IFN-γ分泌情况来检测特异性的T细胞*反应。它可以代替传统的皮肤测试，同时大大提高了敏感性和特异性，并且不受卡介苗接种影响。ELISPOT还可用于其他*性疾病如乙型hepatitis、丙型hepatitis、EB病毒、巨细胞病毒、莱姆病等的抗**研究与诊断。
02vaccine研究
ELISPOT方法是检测和评价vaccine的细胞*水平的国际公认的标准工具。国际上普遍采用IFN-γ ELISPOT法监测HIV vaccine研究中的*应答反应，在国际AIDS vaccine行动计划中的大量监测新型HIV候选vaccine的试验中采用ELISPOT法对评价T细胞功能。ELISPOT方法是通过测量vaccine诱导较强T细胞反应的能力，来定义vaccine的效果。在vaccine研发和设计时，可应用ELISPOT方法筛选确定抗原的特异性T细胞表位；这些信息还可以被用于评估合适的*策略以及*途径。
酶联*斑点检测多少钱（ELISPOT）的原理是什么呢
（一）原理：细胞受到刺激后局部产生*，被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后，再与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
（二）ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应，在Microplate reader上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏，能从20万～30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb，在研究者以刺激剂activation细胞时，不会影响活化细胞分泌*。
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