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酶联*斑点法技术,BIOREADER 7000 E y哪家好
BIOREADER 7000 E y哪家好是一种用于在单细胞水平上对分泌*或*球蛋白的细胞进行定量的灵敏分析方法。细胞分泌的*、*球蛋白或其他靶蛋白在分泌后立即被特异性Antibody捕获,并在整个刺激过程中被持续捕获。ELISpot可以在25万个细胞中检测出一个有响应的细胞,是zui灵敏的细胞分析方法之一。该检测方法稳健且易于操作,因此既适用于大规模试验,也适用于实用研究。ELISpot已被广泛应用于研究*性疾病、cancer、过敏和自身*性疾病的特异性*反应,以及特别热门的coronavirus vaccine开发领域。
BIOREADER 7000 E y哪家好实验步骤与原理示意 (示意图如下)
大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准
Step.1 包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌*
Step.3 捕获分泌物:activation后的细胞,分泌的*被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
BIOREADER 7000 E y哪家好已成功应用领域BIOREADER 7000 E y哪家好已成功应用领域
01*性疾病诊断与研究
ELISPOT除了作为一种科研工具,也被用于临床诊断。近期First个被SFDA批准的基于ELISPOT法的诊断平台(T-Spot.TB)上市。这项用于检测tuberculosis*的测试方法,是通过测量tuberculosis特异性抗原刺激后的IFN-γ分泌情况来检测特异性的T细胞*反应。它可以代替传统的皮肤测试,同时大大提高了敏感性和特异性,并且不受卡介苗接种影响。ELISPOT还可用于其他*性疾病如乙型hepatitis、丙型hepatitis、EB病毒、巨细胞病毒、莱姆病等的抗**研究与诊断。
02vaccine研究
ELISPOT方法是检测和评价vaccine的细胞*水平的国际公认的标准工具。国际上普遍采用IFN-γ ELISPOT法监测HIV vaccine研究中的*应答反应,在国际AIDS vaccine行动计划中的大量监测新型HIV候选vaccine的试验中采用ELISPOT法对评价T细胞功能。ELISPOT方法是通过测量vaccine诱导较强T细胞反应的能力,来定义vaccine的效果。在vaccine研发和设计时,可应用ELISPOT方法筛选确定抗原的特异性T细胞表位;这些信息还可以被用于评估合适的*策略以及*途径。
为什么选择BIOREADER 7000 E y哪家好?
高灵敏度:20万-30万中1个阳性细胞检测率;
直观、可信度高:单细胞水平检测,一个阳性细胞一个斑点,斑点数量代表分泌*的细胞数量多少,斑点大小代表该细胞分泌*水平的多少;
高通量:一块ELISPOT板可作96test,科研工作者每天可检测数百个样品,只需少量细胞如45mL血液就足以用于测试600种不同抗原/肽类物质的反应;
Living cells功能检测:检测到的*不是已存在的,而是在检测过程中,被加入的刺激物刺激而分泌出来的;
临床实验适用:经过冻存复苏的细胞并不丧失*功能,对临床试验非常重要,Before and after treatment的样本可以进行平行测试,结果可以重复;如果试验涉及多个临床机构,血样可冻存、运输到实验室进行检测。
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