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粪大肠菌群快速检测 (酶底物法)
1.适用范围
本方法适用于生活饮用水及其水源水、地表水、污水、废水等水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)的定性检测、定量检测
2.方法原理
固定底物酶底物法(DST)采用大肠菌群细菌能产生β-半乳糖苷酶分解ONPG使培养液呈黄色的原理,来判断水样中是否含粪大肠菌群(耐热大肠菌群),粪大肠的培养温度是44.5℃。
3.仪器设备
3.1 程控定量封口机
3.2电热恒温培养箱
3.3 冰箱
3.4 51孔定量盘、97孔定量盘
3.5 100ml无菌水样瓶
3.6 高压蒸汽灭菌锅
3.7 干热灭菌器
3.8 量筒
3.9 吸管
3.10 试管
酶底物法封口机检测优势酶底物法封口机检测优势
1.无需在无菌室内操作。
2.手工操作时间小于1分钟。
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
4.24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
操作方法
一:将水样加入100ml取样瓶中,加入酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解。
二:将样品加到定量检测盘中。
三:使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。
四:将封口好的定量检测盘放在36±1℃,如需测定粪大肠菌群(耐热大肠菌群)则将培养箱设定为44.5℃,培养24h。
五:对照比色盘数阳性(显黄色,或荧光)格子数,按照使用的检测盘类型,分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数,对照MPN表出数据。
六:根据稀释倍数结果按公式计算结果大肠菌群(个/L)=MPN值×稀释倍数×1000mL/100mL。
程控定量封口机维修保养细则及清洁实施方案程控定量封口机维修保养细则及清洁实施方案
酶底物法避免了传统检测方法中实际操作繁杂、费时费力、实验环境标准高的缺陷,是现阶段在实验室中用来检测大肠菌群的常见方法。程控定量封口机在酶底物法检测中扮演着重要辅助角色,,所以我们在日常操作时要注意对其进行保养与清洁,下面就和大家分享一下程控定量封口机的维修保养细则与清洁实施方案。
程控定量封口机维修保养细则
1、实际操作技术人员经培训学习后方可使用仪器,并严格遵循培训学习与设备说明书的相关标准,以免影响检测结果的准确性,甚至对人员和设备造成损害。
2、将仪器放置在干燥通风的环境中,远离装有水、溶液等液体的玻璃器皿,防止仪器内部进水以及零部件出现锈蚀等情况。
3、禁止将定量检测孔板以外的物品推入程控定量封口机。
4、使用仪器过程中,应注意衣服、头发、手指等远离进口,如果不小心被卷入封口机,应立即按下仪器进口处的反转按钮。此外,如果放入检测孔板时托盘导槽未放平,也需按下反转按钮,需要注意的是,如果橡胶垫已经进入仪器,请不要再进行反转操作。
5、如果有多个待封口的检测孔板,可将多个胶托依次连续放入仪器进行封口。
6、定量孔板封口完毕后,应先关闭设备电源开关,然后再拔掉电源插头。
7、若仪器出现问题故障无法正常操作使用时,应马上停止任何动作并关闭设备电源,然后联系厂家进行售后服务,切勿私自拆卸机器。
程控定量封口机问题故障及解决方法程控定量封口机问题故障及解决方法
故障:信号指示灯
1、电源指示灯不亮。
①查验是不是正确连接开关电源,工作电压是不是相符合;
②检查设备后边的电源总开关键是不是开启;
③查验保险丝有没有毁坏,如损坏进行更换。
2、加热十分钟后绿色指示灯才亮起。及时联系生产厂家,让技术人员处理。
3、绿色指示灯在使用时灭掉。加热辊没有达到密封温度,等绿灯变亮后再次进行操作。
4、绿色指示灯熄灭,仪器底部有液体漏。一般为水质采样超过100ml或设备倾斜所致,通常伴随“嘶嘶”声,此时只需拆下设备正面底座挡板,将积水擦干净即可。
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